Medicinal leeches extract at complex treatment of experimental acute myocardial infarction in rats

Full Text

Введение Секрет слюнных желез медицинской пиявки оказывает на организм многофакторное воздействие, которое реализуется как местно - на уровне микроциркуляторного русла, так и системно - на уровне целостного организма. К важнейшим составляющим секрета слюнных желез пиявки относятся гирудин, дестабилаза, оргелаза, антистазин, векорзин, калин, эглин, лизоцим, а также ингибиторы трипсина и химотрипсина и др. [1]. Показано, что биологически активные вещества, продуцируемые медицинскими пиявками (Hirudo medicinalis), обеспечивают профилактику тромбозов, улучшение микроциркуляции, стимуляцию внутриклеточного обмена, обладают обезболивающим, антибактериальным, противовоспалительным, антиатерогенным, иммуностимулирующим и стресс-протекторным действием [2]. Экстракт цельных медицинских пиявок (Гирулюкс), представляющий собой источник биологически активных веществ, все активнее применяется при создании новых лекарственных средств лечения периферических нарушений кровообращения [3]. Представлялось интересным изучить влияние экстракта медицинской пиявки на течение острого экспериментального инфаркта миокарда (ИМ). Материалы и методы Исследование влияния лекарственной субстанции экстракта медицинской пиявки на течение ИМ проводили по стандартной методике Селье [4] на беспородных крысах-самцах массой 180-200 г. Под рауш-наркозом (эфир) проводили торако- (по IV межреберью) и перикардотомию. Под левую коронарную артерию на 4-5 мм ниже ее выхода из-под ушка подводили лавсановую лигатуру и производили одномоментную перевязку коронарной артерии. Рану послойно ушивали и вводили антибиотики. Животные были рандомизированы на 3 группы: 1-я группа - ложно оперированные животные (n=6), у которых перевязка коронарной артерии не производилась; 2-я группа - контрольные животные с экспериментальным ИМ, которым перорально вводили плацебо (физиологический раствор) в течение 7 дней (n=8); 3-я группа - животные с экспериментальным ИМ, получавшие перорально препарат на основе экстракта пиявки 50 мг/кг в течение 7 дней (n=8). Перед операцией и на 7-й день эксперимента у всех животных регистрировали электрокардиограмму (ЭКГ) в стандартных отведениях (I, II, III AVL). После последней регистрации ЭКГ животных наркотизировали уретаном (1300 мг/кг, внутрибрюшное введение), вскрывали грудную клетку, извлекали сердца, которые фиксировали в 10% растворе формалина для гистоморфологических исследований. С помощью замораживающего микротома изготавливали поперечные срезы сердца, взятые с двух уровней - верхушки и середины, толщиной 15-20 микрон. Срезы окрашивали по стандартным методикам - галлоцианин-эозином, а также пикрофуксином по Ван-Гизону. Микропрепараты изучали в проходящем свете. Проводили визуальную качественную оценку микропрепаратов сердца с описанием картины поврежденной ткани. Количественную оценку проводили с помощью сетки Автандилова и окуляр-микрометра. Полученные результаты обрабатывались статистически (рассчитывали медианы, 25 и 75% выборок). Статистическую значимость различий между выборками определяли с помощью двустороннего критерия Манна-Уитни (p<0,05). Результаты и обсуждение Влияние препарата с экстрактом пиявки медицинской на скорость формирования патологического зубца Q, отражающую динамику формирования зоны некроза миокарда В контрольной группе и группе животных, получавших экстракт медицинской пиявки, в отличие от ложно оперированных животных на ЭКГ хотя бы в одном отведении наблюдался патологический зубец Q. По сравнению с контрольной группой животных (2-я группа) изучаемое вещество (3-я группа) не оказывало статистически значимое влияние на суммарную величину зубца Q во всех регистрируемых отведениях. Медиана этого показателя составляла 0,39±0,03 и 0,57±0,02 мВ соответственно (р=0,16). Влияние препарата на основе экстракта медицинской пиявки на морфогистологические характеристики миокарда у животных с экспериментальным ИМ После окончательной регистрации ЭКГ у экспериментальных животных извлекали сердца и фиксировали в 10% растворе формалина. На микропрепаратах, полученных из сердец крыс контрольной группы, обнаружен выраженный, неправильной формы, трансмуральный инфаркт левого желудочка. Гистологическая картина сердечной мышцы контрольных животных с ИМ характеризовалась резкой сосудистой реакцией, большинство миокардиоцитов находилось в состоянии дистрофии, а некоторые и некробиоза. На срезах в левом желудочке обнаруживался сформировавшийся соединительнотканный рубец, выраженный сильнее всего в срединной части органа. Вокруг соединительнотканного рубца, а местами и вокруг некробиотически измененных миокардиоцитов группировались полиморфноядерные нейтрофилы и лимфомакрофагальные элементы. Гистологическое изучение сердец животных, которым экспериментально воспроизводили ИМ и перорально вводили экстракт пиявок, демонстрирует сходную картину. Из полученных данных следует, что пероральное применение препарата с экстрактом пиявки медицинской по сравнению с контролем не изменяет величины зубца Q на ЭКГ и не ухудшает гистоморфологическое состояние ишемизированного миокарда у крыс с экспериментальным ИМ. Однако результаты эксперимента противоречат опубликованным в литературе данным о результативности применения как методов гирудотерапии, так и фармакологических препаратов на основе пиявок при терапии ИМ [5]. Возможно, это связано с некорректным выбором или способом введения препарата, или самой модели экспериментального ИМ. Однако, поскольку в перспективе планируется разработка лекарственных средств на основе пиявки перорального введения, с уверенностью можно говорить об отсутствии негативного воздействия препарата на основе экстракта пиявки на функционирование сердечной мышцы. Выводы Таким образом, полученные нами результаты свидетельствуют о безопасности применения препарата на основе экстракта медицинской пиявки в комплексной терапии ИМ (при наличии сопутствующих заболеваний, для которых доказана эффективность терапии препаратом с экстрактом пиявки).

About the authors

G. I Nikonov

International Medical Leech Centre

140140, Russian Federation, vil. Udel'naia, ul. Oktiabr'skaia, d. 40

S. A Kryzhanovskii

V.V.Zakusov Institute of Pharmacology

A. O Lebedeva

International Medical Leech Centre

Email: romanenkoao@mail.ru
140140, Russian Federation, vil. Udel'naia, ul. Oktiabr'skaia, d. 40

References

Supplementary files