Medicinal leeches extract at complex treatment of experimental acute myocardial infarction in rats

Abstract


Creating of pharmacological forms based on the medicinal leech extract is a perspective decision of various clinical pathologies. To introduce a new drug into clinical practice is need to investigate its influence on the treatment effectivity at different diseases. The effect of the medicinal leeches Hirudo medicinalis extract for course of experimental acute myocardial infarction in rats was rated. The results of the study indicate the possibility of Hirudo medicinalis extract safe use for complex treatment of myocardial infarction.

Full Text

Введение Секрет слюнных желез медицинской пиявки оказывает на организм многофакторное воздействие, которое реализуется как местно - на уровне микроциркуляторного русла, так и системно - на уровне целостного организма. К важнейшим составляющим секрета слюнных желез пиявки относятся гирудин, дестабилаза, оргелаза, антистазин, векорзин, калин, эглин, лизоцим, а также ингибиторы трипсина и химотрипсина и др. [1]. Показано, что биологически активные вещества, продуцируемые медицинскими пиявками (Hirudo medicinalis), обеспечивают профилактику тромбозов, улучшение микроциркуляции, стимуляцию внутриклеточного обмена, обладают обезболивающим, антибактериальным, противовоспалительным, антиатерогенным, иммуностимулирующим и стресс-протекторным действием [2]. Экстракт цельных медицинских пиявок (Гирулюкс), представляющий собой источник биологически активных веществ, все активнее применяется при создании новых лекарственных средств лечения периферических нарушений кровообращения [3]. Представлялось интересным изучить влияние экстракта медицинской пиявки на течение острого экспериментального инфаркта миокарда (ИМ). Материалы и методы Исследование влияния лекарственной субстанции экстракта медицинской пиявки на течение ИМ проводили по стандартной методике Селье [4] на беспородных крысах-самцах массой 180-200 г. Под рауш-наркозом (эфир) проводили торако- (по IV межреберью) и перикардотомию. Под левую коронарную артерию на 4-5 мм ниже ее выхода из-под ушка подводили лавсановую лигатуру и производили одномоментную перевязку коронарной артерии. Рану послойно ушивали и вводили антибиотики. Животные были рандомизированы на 3 группы: 1-я группа - ложно оперированные животные (n=6), у которых перевязка коронарной артерии не производилась; 2-я группа - контрольные животные с экспериментальным ИМ, которым перорально вводили плацебо (физиологический раствор) в течение 7 дней (n=8); 3-я группа - животные с экспериментальным ИМ, получавшие перорально препарат на основе экстракта пиявки 50 мг/кг в течение 7 дней (n=8). Перед операцией и на 7-й день эксперимента у всех животных регистрировали электрокардиограмму (ЭКГ) в стандартных отведениях (I, II, III AVL). После последней регистрации ЭКГ животных наркотизировали уретаном (1300 мг/кг, внутрибрюшное введение), вскрывали грудную клетку, извлекали сердца, которые фиксировали в 10% растворе формалина для гистоморфологических исследований. С помощью замораживающего микротома изготавливали поперечные срезы сердца, взятые с двух уровней - верхушки и середины, толщиной 15-20 микрон. Срезы окрашивали по стандартным методикам - галлоцианин-эозином, а также пикрофуксином по Ван-Гизону. Микропрепараты изучали в проходящем свете. Проводили визуальную качественную оценку микропрепаратов сердца с описанием картины поврежденной ткани. Количественную оценку проводили с помощью сетки Автандилова и окуляр-микрометра. Полученные результаты обрабатывались статистически (рассчитывали медианы, 25 и 75% выборок). Статистическую значимость различий между выборками определяли с помощью двустороннего критерия Манна-Уитни (p<0,05). Результаты и обсуждение Влияние препарата с экстрактом пиявки медицинской на скорость формирования патологического зубца Q, отражающую динамику формирования зоны некроза миокарда В контрольной группе и группе животных, получавших экстракт медицинской пиявки, в отличие от ложно оперированных животных на ЭКГ хотя бы в одном отведении наблюдался патологический зубец Q. По сравнению с контрольной группой животных (2-я группа) изучаемое вещество (3-я группа) не оказывало статистически значимое влияние на суммарную величину зубца Q во всех регистрируемых отведениях. Медиана этого показателя составляла 0,39±0,03 и 0,57±0,02 мВ соответственно (р=0,16). Влияние препарата на основе экстракта медицинской пиявки на морфогистологические характеристики миокарда у животных с экспериментальным ИМ После окончательной регистрации ЭКГ у экспериментальных животных извлекали сердца и фиксировали в 10% растворе формалина. На микропрепаратах, полученных из сердец крыс контрольной группы, обнаружен выраженный, неправильной формы, трансмуральный инфаркт левого желудочка. Гистологическая картина сердечной мышцы контрольных животных с ИМ характеризовалась резкой сосудистой реакцией, большинство миокардиоцитов находилось в состоянии дистрофии, а некоторые и некробиоза. На срезах в левом желудочке обнаруживался сформировавшийся соединительнотканный рубец, выраженный сильнее всего в срединной части органа. Вокруг соединительнотканного рубца, а местами и вокруг некробиотически измененных миокардиоцитов группировались полиморфноядерные нейтрофилы и лимфомакрофагальные элементы. Гистологическое изучение сердец животных, которым экспериментально воспроизводили ИМ и перорально вводили экстракт пиявок, демонстрирует сходную картину. Из полученных данных следует, что пероральное применение препарата с экстрактом пиявки медицинской по сравнению с контролем не изменяет величины зубца Q на ЭКГ и не ухудшает гистоморфологическое состояние ишемизированного миокарда у крыс с экспериментальным ИМ. Однако результаты эксперимента противоречат опубликованным в литературе данным о результативности применения как методов гирудотерапии, так и фармакологических препаратов на основе пиявок при терапии ИМ [5]. Возможно, это связано с некорректным выбором или способом введения препарата, или самой модели экспериментального ИМ. Однако, поскольку в перспективе планируется разработка лекарственных средств на основе пиявки перорального введения, с уверенностью можно говорить об отсутствии негативного воздействия препарата на основе экстракта пиявки на функционирование сердечной мышцы. Выводы Таким образом, полученные нами результаты свидетельствуют о безопасности применения препарата на основе экстракта медицинской пиявки в комплексной терапии ИМ (при наличии сопутствующих заболеваний, для которых доказана эффективность терапии препаратом с экстрактом пиявки).

About the authors

G. I Nikonov

International Medical Leech Centre

140140, Russian Federation, vil. Udel'naia, ul. Oktiabr'skaia, d. 40

S. A Kryzhanovskii

V.V.Zakusov Institute of Pharmacology


A. O Lebedeva

International Medical Leech Centre

Email: romanenkoao@mail.ru
140140, Russian Federation, vil. Udel'naia, ul. Oktiabr'skaia, d. 40

References

  1. Геращенко Л., Никонов Г. Вам поможет медицинская пиявка: энциклопедия гирудотерапии: лечение без лекарств. М.: АСТ, Астрель; Транзиткнига, 2005.
  2. Никонов Г.И., Латрилль Ж. Научные основы гирудотерапии. В кн.: Гирудотерапия (Ред. В.А.Савинов). М.: Медицина, 2004; с. 18-24.
  3. Лебедева А.О., Митрохин Н.М., Никонов Г.И. Противоотечное и противовоспалительное действия лекарственной субстанции Гирулюкс в экспериментах на животных. Разработка и регистрация лекарственных средств. 2014; 1 (6): 58-60.
  4. Selye H, Bajusz E, Grasso S. Simple techniques for the surgical occlusion of coronary vessels in the rat. Angiology 1960; 11: 398-407.
  5. Гирудотерапия. Методические рекомендации для практических врачей. Типография МЗ СССР. 1990.

Statistics

Views

Abstract - 20

Cited-By


Article Metrics

Metrics Loading ...

PlumX

Dimensions

Refbacks

  • There are currently no refbacks.

Copyright (c) 2015 Nikonov G.I., Kryzhanovskii S.A., Lebedeva A.O.

Creative Commons License
This work is licensed under a Creative Commons Attribution-NonCommercial 4.0 International License.

This website uses cookies

You consent to our cookies if you continue to use our website.

About Cookies